生物領(lǐng)域應(yīng)用原位雜交技術(shù)的例子:
基因表達(dá)和調(diào)控研究:原位雜交技術(shù)可以用于研究基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。例如,可以標(biāo)記特定基因的探針,檢測(cè)該基因在不同環(huán)境、不同生長(zhǎng)條件下的表達(dá)情況,進(jìn)而研究其表達(dá)調(diào)控機(jī)制。
細(xì)胞分化與發(fā)育研究:在細(xì)胞分化與發(fā)育研究中,原位雜交技術(shù)常被用于檢測(cè)和定位特定基因的表達(dá)情況,進(jìn)而了解細(xì)胞分化的過(guò)程和機(jī)制。例如,可以標(biāo)記與細(xì)胞分化相關(guān)的基因探針,植物原位雜交,檢測(cè)該基因在不同組織、不同發(fā)育階段的表達(dá)情況。
原位雜交第三天
1) 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,原位雜交,再用1mlMABT溶液置換,一小時(shí)以上,后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。
2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘。
3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動(dòng),室溫下顯色。
4)每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開始顯色
5)將顯色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定,染色體原位雜交,拍照。
6)4C冰箱保存。
原位雜交技術(shù)還在以下生物領(lǐng)域有應(yīng)用:
細(xì)胞化學(xué)和學(xué):原位雜交技術(shù)可以用于研究細(xì)胞內(nèi)特定化學(xué)物質(zhì)的定位和分布,例如檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)酶、、神經(jīng)遞質(zhì)等物質(zhì)的分布和定位。此外,還可以應(yīng)用于學(xué)研究,原位雜交檢測(cè),例如檢測(cè)細(xì)胞、分子的分布和定位等。
神經(jīng)科學(xué):在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)常被用于研究神經(jīng)元的生長(zhǎng)、發(fā)育和連接等過(guò)程。例如,通過(guò)標(biāo)記特定基因的探針,可以檢測(cè)神經(jīng)元中特定基因的表達(dá)和定位,進(jìn)而研究其在神經(jīng)信號(hào)傳遞、神經(jīng)環(huán)路形成等方面的作用。
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