植物原位雜交-原位雜交-貝科新肽(查看)

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號(hào)：589580406 更新時(shí)間：2024-12-31

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

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RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。該技術(shù)是指運(yùn)用cRNA或寡核苷酸等探針檢測(cè)細(xì)胞和組織內(nèi)RNA表達(dá)的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是：在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下，用標(biāo)記的已知的RNA核苷酸片段，按核酸雜交中堿基配對(duì)原則，與待測(cè)細(xì)胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合(雜交)，所形成的雜交體(Hybrids)經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術(shù)經(jīng)不斷改進(jìn)，其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠(yuǎn)超出DNA原位雜交技術(shù)。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析，原位雜交，已成為有效的分子病理學(xué)技術(shù)，植物原位雜交，同時(shí)在分析低豐度和罕見的mRNA表達(dá)方面已展示了分子生物學(xué)的一重要方向。

一. 原位雜交天

1. 重新水化和固定

1）吸取固定好的胚胎，加入50%的PBST溶液，放置5分鐘。

2）置換成30％的PBST溶液，放置5分鐘

3）置換成PBST溶液，放置5分鐘，重復(fù)一次

4）置換成4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘

5）用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。

蛋白酶處理與后固定（本實(shí)驗(yàn)不做此步）

1）用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節(jié)以下的胚胎不處理，5體節(jié)到24小時(shí)的胚胎處理3分鐘，24小時(shí)以上的胚胎處理5分鐘或者更長(zhǎng)。發(fā)育時(shí)間越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶處理，發(fā)育時(shí)間長(zhǎng)的胚胎就需要用蛋白酶來疏松組織，原位雜交技術(shù)，以便于雜交。

2）用PBST溶液輕洗，在PBST中放置5分鐘。

3）用4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘，室溫。

4）用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，原位雜交檢測(cè)，室溫。

植物組織原位雜交技術(shù)在植物基因表達(dá)和調(diào)控研究中具有廣泛的應(yīng)用。它可以用來研究植物發(fā)育、生長(zhǎng)、逆境響應(yīng)等方面的基因表達(dá)模式和調(diào)控機(jī)制。例如，可以利用該技術(shù)研究植物中的轉(zhuǎn)錄因子、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、代謝途徑等基因的表達(dá)和調(diào)控。此外，植物組織原位雜交技術(shù)還可以用來鑒定植物中的病原體、檢測(cè)植物等方面。

總之植物組織原位雜交技術(shù)是一種重要的分子生物學(xué)技術(shù)，可以用來研究植物基因的表達(dá)和調(diào)控。它具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠、應(yīng)用廣泛等優(yōu)點(diǎn)，是植物分子生物學(xué)研究中不可或缺的工具。

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