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武漢貝科新肽科技有限公司

主營:原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選

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染色體原位雜交-武漢貝科新肽公司

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  • 主營業(yè)務(wù):原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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原位雜交技術(shù)的原理是什么?有何用途

原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì),結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個(gè)重要條件:組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。

原位雜交(In situ hybridazation)

固定

收集斑馬魚的胚胎,在Holfretor水中培養(yǎng),到達(dá)所需要的發(fā)育時(shí)期時(shí),用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時(shí)后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后換成,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養(yǎng),可阻斷色素的形成)

熒光原位雜交(FISH)技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn):

高特異性:熒光探針的合成是定向的,保證了雜交過程的特異性,可以有效地降低非特異性雜交和背景干擾。

高靈敏度:熒光信號(hào)的檢測比性信號(hào)的檢測更靈敏,可以檢測出低拷貝數(shù)的DNA序列,染色體原位雜交,甚至可以檢測單個(gè)基因序列。

快速簡便:FISH技術(shù)操作簡便,雜交過程可以在數(shù)小時(shí)或數(shù)天內(nèi)完成,而且不需要過于復(fù)雜的設(shè)備,便于在實(shí)驗(yàn)室開展。

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