病理切片的制作步驟注意事項:
一、負責組織處理的技術(shù)員從醫(yī)生手中收標本時,必須清點查對,無誤后簽收。
二、組織脫水、包埋、切片、染色、封片等,均應(yīng)按照技術(shù)規(guī)范進行,對每道工序,都必須查對組織數(shù)量,檢查是否遺漏、丟失。
甲1苯1胺藍染色原理:甲1苯1胺藍是一種常用的人工合成染料,屬于醌亞1胺染料類。這類染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個發(fā)色團,從而成色原顯色。甲1苯1胺藍中的陽離子有染色作用,組織細胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。甲1苯1胺藍不僅含有兩個發(fā)色團,還含有兩個助色團,能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團對組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細胞著色,可染細胞核使之呈藍色。甲1苯1胺藍染色液由于硼酸鹽緩沖液呈強堿性,更利于組織細胞的著色。
葉片內(nèi)分布著大小不同的葉脈,植物切片檢測技術(shù)服務(wù),沿著葉片中央縱軸有一條很明顯的葉脈稱為主脈,其余的葉脈稱為側(cè)脈。雙子葉植物由主脈向兩側(cè)發(fā)出許多側(cè)脈,側(cè)脈再分出細脈,側(cè)脈和細脈彼此交叉形成網(wǎng)狀,稱為網(wǎng)狀脈;單子葉植物的主脈明顯,側(cè)脈由基部發(fā)出直達葉尖,各葉脈平行,稱為平行脈。一些低等的被子植物、蕨類植物和裸子植物葉脈作二叉分枝,形成叉狀脈,是比較原始的葉脈。
葉片又可以分為葉尖、葉基、葉緣等部分,每種植物葉片的形態(tài)特征可作為識別植物的依據(jù)之一。
石蠟包埋切片實驗基本步驟主要有以下幾步:
1、取材:新鮮組織固定于4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風(fēng)櫥內(nèi)用手術(shù)刀將目的部位組織修平整,將修切好的組織和對應(yīng)的標簽放于脫水盒內(nèi)。
2、脫水:將脫水盒放進吊籃里于脫水機內(nèi)依次梯度酒精進行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min-無水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蠟I1h-蠟II1h-蠟III 1h。
3、包埋:將浸好蠟的組織于包埋機內(nèi)進行包埋。先將融化的蠟放入包埋框,待蠟?zāi)讨皩⒔M織從脫水盒內(nèi)取出按照包埋面的要求放入包埋框并貼上對應(yīng)的標簽。于-20°凍臺冷卻,蠟?zāi)毯髮⑾瀴K從包埋框中取出并修整蠟塊。
4、切片:將修整好的蠟塊置于石蠟切片機上切片,片厚4μm。切片漂浮于攤片機40℃溫水上將組織展平,用載玻片將組織撈起,并放進60℃烘箱內(nèi)烤片。待水烤干蠟烤化后取出常溫保存?zhèn)溆谩?/p>
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