滴加FITC-TSA:滴加FITC-TSA試劑,避光室溫反應(yīng)5min。后TBST洗3次×10min,PBS洗1次×5min。
DAPI復(fù)染核:切片滴加DAPI染液,提供酵母雙雜交技術(shù)服務(wù),避光孵育8min,沖洗后滴加抗熒光淬滅封片1劑封片。
鏡檢拍照:切片于尼康正置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發(fā)波長(zhǎng)330-380nm,發(fā)射波長(zhǎng)420nm,發(fā)藍(lán)光;FAM(488)綠光激發(fā)波長(zhǎng)465-495nm,發(fā)射波長(zhǎng)515-555 nm,發(fā)綠光;CY3紅光激發(fā)波長(zhǎng)510-560,發(fā)射波長(zhǎng)590nm,發(fā)紅光。)
原位雜交第三天
1) 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,一小時(shí)以上,后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。
2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘。
3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動(dòng),室溫下顯色。
4)每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)始顯色
5)將顯色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。
6)4C冰箱保存。
提供酵母雙雜交技術(shù)服務(wù)-科銳諾(推薦商家)由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司為客戶提供“外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)”等業(yè)務(wù),公司擁有“科銳諾”等品牌,專注于技術(shù)合作等行業(yè)。,在湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號(hào)武漢國(guó)英種子A棟1樓的名聲不錯(cuò)。歡迎來(lái)電垂詢,聯(lián)系人:王經(jīng)理。溫馨提示:以上是關(guān)于武漢科銳諾(查看)-提供酵母雙雜交技術(shù)服務(wù)的詳細(xì)介紹,產(chǎn)品由武漢科銳諾生物科技有限公司為您提供,如果您對(duì)武漢科銳諾生物科技有限公司產(chǎn)品信息感興趣可以聯(lián)系供應(yīng)商或者讓供應(yīng)商主動(dòng)聯(lián)系您 ,您也可以查看更多與技術(shù)合作相關(guān)的產(chǎn)品!
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