NTA檢測-武漢科銳諾

詢盤留言 |投訴|申領|刪除 產品編號：583681076 更新時間：2024-08-20

武漢科銳諾生物科技有限公司

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iTRAQ (isobarictags for relative and absolute quantitation，同位素標記相對和絕1對定量)是由AB SCIEX公司研發(fā)的一種體外同重同位素標記的相對與絕1對定量技術。該技術使用8種（或4種）不同的同位素試劑來同時標記和比較8種（或4種）不同的蛋白質樣品。這些試劑由3個不同的化學標簽組成：報告部分，肽反應部分和平衡部分。報告部分為客戶可按需選擇標記個數，肽反應基團將iTRAQ標簽與肽段的N-端基團和每個賴氨酸側鏈相連，NTA檢測，可標記所有酶解肽段，平衡部位可保證iTRAQ試劑標記的不同樣本的同一肽段具有相同的質荷比，因此改變任一iTRAQ試劑，不同同位素在標記同一多肽后在一級質譜檢測，分子量都完全相同。而在串聯(lián)質譜中，同重元素標記肽段平衡基團在二級質譜發(fā)生中性丟失。信號離子表現為不同質荷比的峰，因此，根據波峰的高度及面積，可以得到蛋白質的定量信息。

外泌體研究開展的如火如荼。不論是 SCI 文章的發(fā)表還是各類基1金的申請，外泌體相關研究表現都非常亮眼。外泌體提取后，研究人員面臨的一個重要問題就是，我提取的是不是外泌體？如果是的話，質量如何？

現階段，對外泌體進行鑒定主要有三種主流的方法：電鏡、粒徑和 Western blot 分析靶標物。之前我們已經對外泌體電鏡進行了總結，今天我們來看看外泌體的粒徑分析。

外泌體粒徑分析原理

外泌體粒徑分析方法為納米顆粒跟蹤分析（Nanoparticle tracking Analysis， NT A)，其原理是對每個顆粒的布朗運動進行追1蹤和分析，結合 Stockes-Einstein 方程式計算出納米顆粒的流體力學直徑和濃度。NT A技術已被外泌體研究領域認可為外泌體表征手段之一。相較于其他表征方式，NT A技術的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快。

外泌體不僅含有蛋白質抗原，還含有分泌細胞來源的mRNA或non-coding RNA（特別是miRNA），其功能引起廣泛關注。外泌體的脂質雙分子層膜可保護這些RNA，不被RNase分解，在血液、體液中穩(wěn)定存在。在外泌體及其分泌細胞中均可檢測出RNA，也存在僅能在其中之一檢測出RNA的情況，因此我們設想存在一種可以選擇性將特定的RNA吸收至外泌體的機制。

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