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主營(yíng)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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原位雜交第三天
1） 用1ml含10％熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時(shí)以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。
2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。
3）將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate(底物，用之前加5mM左旋米唑)，十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動(dòng)，室溫下顯色。
4）每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)始顯色
5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4％多聚甲醛固定，拍照。
6）4C冰箱保存。
原位雜交技術(shù)在其他生物領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用，例如：
植物學(xué)研究：在植物學(xué)研究中，原位雜交技術(shù)可以用于檢測(cè)和定位特定基因的表達(dá)，研究基因組結(jié)構(gòu)和進(jìn)化。此外，還可以應(yīng)用于植物染色體組型分析、基因組印記研究等方面。
微生物學(xué)研究：在微生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究細(xì)菌、病毒等微生物的基因表達(dá)和定位，以及它們?cè)诃h(huán)境中的分布和相互作用。例如，通過(guò)標(biāo)記特異性探針，熒光原位雜交，可以檢測(cè)腸道微生物群落中的特定，研究其在人體健康和疾病發(fā)生中的作用。
植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個(gè)方面：
1. 制備組織樣品：從植物中取出需要研究的組織樣品，如根、莖、葉等。
2. 固定組織樣品：將組織樣品固定在載玻片上，通常使用或乙醇等化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行固定。
3. 處理組織樣品：對(duì)固定的組織樣品進(jìn)行脫水、透明化、脫脂等處理，以便于DNA探針的穿透和結(jié)合。
4. 制備DNA探針：根據(jù)需要研究的基因序列，設(shè)計(jì)并合成DNA探針。DNA探針可以標(biāo)記熒光染料或性同位素，以便于檢測(cè)。
5. 雜交DNA探針：將DNA探針與組織樣品進(jìn)行雜交，通常需要在高溫下進(jìn)行，以便于DNA探針與RNA或DNA結(jié)合。
6. 檢測(cè)雜交信號(hào)：通過(guò)熒光顯微鏡或計(jì)數(shù)器等設(shè)備，檢測(cè)DNA探針與RNA或DNA的結(jié)合情況，確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。
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第2年
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