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武漢貝科新肽科技有限公司

主營:原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選

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植物組織原位雜交-武漢貝科新肽公司

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  • 主營業(yè)務(wù):原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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這一原理對于檢測一個(gè)特異的mRNA在某一種生物體,或者某些組織切片、單個(gè)細(xì)胞里具體表達(dá)位置非常有用。該技術(shù)早應(yīng)用于60年代末期,由于核酸分子雜交的特異性高,植物組織原位雜交,并可定位,因此該技術(shù)已被廣泛應(yīng)用,例如與細(xì)胞內(nèi)RNA進(jìn)行雜交以觀察該組織細(xì)胞中特定基因表達(dá)水平。原位雜交能在成分復(fù)雜的組織中進(jìn)行單一細(xì)胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響,因此對于那些細(xì)胞數(shù)量少且散在于其他組織中的細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA研究更為方便;同時(shí)由于原位雜交不需要從組織中提取核酸,對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性,并可完整地保持組織與細(xì)胞的形態(tài),更能準(zhǔn)確地反映出組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。

原位雜交技術(shù)可以應(yīng)用于以下場景:

組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位。例如,可以用于檢測EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA等。

癌基因、抑癌基因及其他各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測。

檢測染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。

在植物基因組研究中的應(yīng)用。例如,通過與特定基因序列的探針進(jìn)行雜交,可以在植物染色體上定位到目標(biāo)基因的位置,進(jìn)而構(gòu)建遺傳圖譜,為植物育種和基因組研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后,把濾膜(編號面朝上)放在一張保鮮膜上,并在保鮮膜上作幾個(gè)不對稱的標(biāo)記,以使濾膜與性自顯影片位置對應(yīng)。

用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時(shí)。

底片顯影后,在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標(biāo)記陽性雜交信號的位置,同時(shí)在不對稱分布點(diǎn)的位置上作出標(biāo)記。可從底片上取下透明紙,通過對比紙上的點(diǎn)與瓊脂上的點(diǎn)來鑒定陽性菌落。

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