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原位雜交技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域

原位雜交技術(shù)在醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)和工業(yè)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。在醫(yī)學(xué)方面,原位雜交技術(shù)可用于檢測癌細(xì)胞、病毒和細(xì)菌等致病微生物,幫助醫(yī)生制定的診斷和方案。在農(nóng)業(yè)方面,原位雜交技術(shù)可用于基因定位、品種鑒定和遺傳育種等領(lǐng)域,提高農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。在工業(yè)方面,原位雜交技術(shù)可用于檢測基因工程產(chǎn)品中的外源DNA,保證產(chǎn)品的安全性和穩(wěn)定性。

根據(jù)核酸探針標(biāo)記物的種類分別進(jìn)行自顯影或利用酶檢測系統(tǒng)進(jìn)行不同顯色處理。細(xì)胞或組織的原位雜交切片在顯示后均可進(jìn)行半定量的測定,如自顯影可利用人工或計算機輔助的圖象分析檢測儀(computer-assisted image analysis)檢測銀粒的數(shù)量和分布的差異。非性核酸探針雜交的細(xì)胞或組織可利用酶檢測系統(tǒng)顯色,然后利用顯微分光光度計或圖像分析儀對不同類型和數(shù)量的核酸的顯色強度進(jìn)行檢測。

在研究DNA分子原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種技術(shù)。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,GISH,在適宜的條件下,能過氫鍵結(jié)合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應(yīng)用帶有標(biāo)記的(有性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質(zhì))DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測核酸(RNA或DNA)片段進(jìn)行雜交,然后可用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位

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