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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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| 先生： |
植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個方面：
1. 制備組織樣品：從植物中取出需要研究的組織樣品，如根、莖、葉等。
2. 固定組織樣品：將組織樣品固定在載玻片上，通常使用或乙醇等化學(xué)物質(zhì)進行固定。
3. 處理組織樣品：對固定的組織樣品進行脫水、透明化、脫脂等處理，以便于DNA探針的穿透和結(jié)合。
4. 制備DNA探針：根據(jù)需要研究的基因序列，設(shè)計并合成DNA探針。DNA探針可以標(biāo)記熒光染料或性同位素，以便于檢測。
5. 雜交DNA探針：將DNA探針與組織樣品進行雜交，通常需要在高溫下進行，以便于DNA探針與RNA或DNA結(jié)合。
6. 檢測雜交信號：通過熒光顯微鏡或計數(shù)器等設(shè)備，檢測DNA探針與RNA或DNA的結(jié)合情況，確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。
原位雜交雜交液
（一）雜交液內(nèi)除含一定濃度的標(biāo)記探針外，還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及載體DNA或RNA等。
（二）雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與組織標(biāo)本之間的靜電結(jié)合。
（三）賈酰胺可使雜交溫度降低，所以雜交液中加入適量的甲酰胺，可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞以及標(biāo)本的脫落。
（四）硫酸葡聚糖能與水結(jié)合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達(dá)到提高雜交率的目的。
熒光原位雜交（FISH）技術(shù)具有以下優(yōu)點：
可多重染色：利用不同的熒光染料標(biāo)記不同的探針，可以實現(xiàn)多重?zé)晒庠浑s交，染色體原位雜交，從而同時檢測多個序列，提高實驗效率了。
高度創(chuàng)新性和性：FISH技術(shù)不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位，還可以用于未基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究，在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢。
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第2年
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