原位雜交技術咨詢-原位雜交-貝科新肽

詢盤留言 |投訴|申領|刪除 產品編號：579764962 更新時間：2024-06-04

武漢貝科新肽科技有限公司

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植物染色體原位雜交技術的應用非常廣泛。例如，它可以用來研究植物基因組的結構和功能，原位雜交服務，包括基因定位、染色體重組、基因表達和基因組演化等方面。此外，原位雜交，該技術還可以用來檢測植物中的染色體異常，如染色體缺失、重復和易位等。

植物染色體原位雜交技術的優(yōu)點在于它可以直接觀察到染色體上的目標DNA序列，而不需要進行PCR擴增或測序等操作。此外，該技術還可以同時檢測多個目標DNA序列，從而提高檢測效率和準確性。

這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體，或者某些組織切片、單個細胞里具體表達位置非常有用。該技術早應用于60年代末期，由于核酸分子雜交的特異性高，原位雜交檢測，并可定位，因此該技術已被廣泛應用，例如與細胞內RNA進行雜交以觀察該組織細胞中特定基因表達水平。原位雜交能在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響，因此對于那些細胞數(shù)量少且散在于其他組織中的細胞內DNA或RNA研究更為方便；同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸，對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性，并可完整地保持組織與細胞的形態(tài)，原位雜交技術咨詢，更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態(tài)。

以菌落原位雜交為例：對分散在若干個瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100-200）進行篩選時，可采用該方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時間后，對菌落進行原位裂解。主平板應貯存于4℃直至得到篩選結果。

將少數(shù)菌落轉移到纖維素濾膜上

（1）在含有選擇性的瓊脂平板上放一張纖維素濾膜。

（2）用無菌牙簽將各個菌落先轉移至濾膜上，再轉移至含有選擇性但未放濾膜的瓊脂主平板上。應按一定的格子進行劃線接種（或打點）。每菌落應分別劃線于兩個平板的相同位置上。后，在濾膜和主平板上同時劃一個含有非重組質粒的菌落。

（3）倒置平板，于37℃培養(yǎng)至劃線的細菌菌落生長到0.5-1.0mm的寬度。

（4）用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂，在3個以上的不對稱位置作標記。在主平板大致相同的位置上也作上標記。

（5）用Parafilm膜封好主平板，倒置貯放于4℃，直至獲得雜交反應的結果。

（6）裂解細菌，按本段下面所述方法，使釋放的DNA結合于纖維素濾膜。

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